看完這些你就知道什么是Millipore PVDF膜了
更新時間:2021-05-12 | 點擊率:4247
Millipore PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜(polyvinylidene fluoride)是蛋白質印跡法中常用的一種固相支持物。PVDF膜是疏水性的,膜孔徑有大有小,隨著膜孔徑的不斷減小,膜對低分子量的蛋白結合就越牢固。
PVDF膜是一種聚偏二氟乙烯(Polyvinylidene Fluoride, PVDF)印跡膜。最常見用于免疫印跡(immunoblot, 即Western blot)時蛋白從膠到膜的轉印,也可用于吸附分析、氨基酸分析、N端蛋白質測序、點和狹縫印跡檢測(dot and slot blot)、糖蛋白顯色和脂多糖分析等。
本PVDF膜0.2μm適用于大多數(shù)的免疫印跡,特別適用于分子量小于20kDa的蛋白質,可以有效減少小分子量蛋白的滲漏。本產(chǎn)品比0.45μm PVDF膜具有更高的蛋白質吸附率和蛋白測序得率,例如對于胰島素、BSA的吸附能力分別是常用的0.45μm PVDF膜的約1.64倍和1.58倍。
與硝酸纖維素膜(Nitrocellulose membrane, NC膜)相比,PVDF膜具有多種優(yōu)點。PVDF膜具有很高的機械強度,不易破裂或卷曲;具有背景低、溶劑相容性廣,以及著色能力優(yōu)異等優(yōu)點;此外,PVDF膜經(jīng)適當處理后還可以重復檢測。
PVDF本質是一種疏水性的聚合物,在水溶液中不會浸濕,為了在水性緩沖液和系統(tǒng)中使用PVDF膜,首先必須將其浸泡在50%(v/v)或更高濃度的醇溶液中。
(PVDF膜在使用時需預處理,用甲醇處理的目的是活化膜上的正電基團,使其更容易與帶負電的蛋白結合。)甲醇、乙醇和異丙醇都適合浸泡這種膜。隨著膜的外觀從不透明到半透明,*浸濕是顯而易見的。之后必須用水反復沖洗以去除醇類,經(jīng)預處理的膜可以直接放入轉印緩沖液中平衡。
一旦膜被浸濕,蛋白結合可通過蛋白與膜的接觸而實現(xiàn)。由于蛋白與膜的結合貫穿整個膜的厚度(深度),結合能力是由孔的內(nèi)部表面積來決定的,隨著膜孔徑的不斷減小,膜對低分子量的蛋白結合就越牢固。
0.2um PVDF膜內(nèi)部表面積大約是0.45um PVDF 膜的三倍,使其吸附能力更高。PVDF膜是疏水性的,一般大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜,小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜。
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