Product classification
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淀粉含量檢測試劑盒 可見分光光度法
產品簡介
產品內容:
試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體20mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。
產品說明:
淀粉是植物中糖的主要儲存形式,其含量測定對于評價食品營養(yǎng)價值和調查植物體內糖代謝都有重要意義。利用80%乙醇可以把樣品中可溶性糖與淀粉分開,進一步采用酸水解法分解淀粉為葡萄糖,采用蒽酮比色法測定葡萄糖含量,即可計算淀粉含量。
需自備儀器和試劑:
可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液器、玻璃比色皿、研缽、冰、濃硫酸和蒸餾水。
操作步驟:
一、淀粉提?。?/strong>
1、 稱取0.1g-0.2g樣品(建議稱取約0.1g樣本)于研缽中研碎,加入1mL試劑一,充分勻漿后轉移到EP管中,80℃水浴提取30min,3000g,常溫離心5min,棄上清,留沉淀。
2、 沉淀中加入0.5mL蒸餾水,放入沸水浴中糊化15min(蓋緊,以防止水分散失)。
3、 冷卻后,加入0.35mL試劑二,常溫提取15min,振蕩3-5次。
4、 加入0.85mL雙蒸水,混勻,3000g,常溫離心10min,取上清液待測。
二、測定操作:
1. 分管光度計預熱30min以上,調節(jié)波長至620nm,蒸餾水調零。
2. 調節(jié)水浴鍋 至95度。
3. 工作液的配制:臨用前在試劑三中加入7.5mL蒸餾水后,緩慢加入42.5mL濃硫酸,不斷攪拌,充分溶解,待用。用不完的試劑4℃保存一周。
4. 樣本測定:取0.2mL樣本和1mL工作液至EP管中,95度水浴10min(蓋緊,放置水分散失),自然冷卻至室溫,在620nm波長下記錄測定吸光值A。
淀粉含量計算:
標準條件下測定的回歸方程為y = 5.872x - 0.0295;x為標準品濃度(g/mL),y為吸光值。
1、 按照蛋白濃度計算
淀粉含量(mg/mg prot)=﹝(A+0.0295)×V1﹞÷5.872÷(V1×Cpr) =0.17×(A+0.0295) ÷Cpr
2、 按樣本鮮重計算
淀粉含量(mg/g 鮮重)= ﹝(A+0.0295)×V1﹞÷ (W×V1÷V2) =0.289×(A+0.0295) ÷W
V1:加入反應體系中樣本體積,0.2mL;V2:加入提取液體積,1.7 mL;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g。
注意事項:
1. 由于工作液具有強腐蝕性,請謹慎操作。
2. 若吸光值大于1,請將樣本用提取液稀釋后再測定,計算公式中乘以相應的稀釋倍數。
3. 提取液的配置:0.35mL試劑二+1.35mL水。用多少按照此比例配多少。
備注:以上數據均來自公開文獻, Solarbio暫未進行獨立驗證, 僅供參考。These protocols are for reference only. Solarbio does not independently validate these methods.實驗圖Standard Curve for Starch Content Assay Kit
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