細(xì)胞發(fā)生凋亡時, 會激活一些DNA內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA,產(chǎn)生180 bp-200 bp的 DNA 片段,表現(xiàn)為瓊脂糖凝膠電泳中呈現(xiàn)的特異的梯狀Ladder圖譜。基因組DNA雙鏈或單鏈斷裂時會出現(xiàn)產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)的催化作用下,與SF/Cy-dUTP結(jié)合,從而通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀直接進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測,這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(Terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA的斷裂,因而沒有3'-OH形成,很少能夠被染色。Tunel法可以對完整的單個凋亡細(xì)胞核或凋亡小體進(jìn)行原位染色,能準(zhǔn)確地反應(yīng)細(xì)胞凋亡典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征,可檢測出極少量的凋亡細(xì)胞,因而在細(xì)胞凋亡的研究中廣泛采用。本試劑盒應(yīng)用范圍廣,可用于檢測冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況,也可檢測培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況??蛇x擇性的檢測凋亡細(xì)胞,而非壞死細(xì)胞或因輻照和藥物治療而造成的 DNA 鏈斷裂的細(xì)胞。本試劑盒檢測細(xì)胞凋亡,耗時短,只需一步染色反應(yīng),洗滌后即可檢測。